Μέλος : Σύνδεση |Εγγραφή |Ανεβάστε τη γνώση
Αναζήτηση
Ανοσοφθορισμός [Τροποποίηση ]
Ο ανοσοφθορισμός είναι μια τεχνική που χρησιμοποιείται για μικροσκοπία φωτός με μικροσκόπιο φθορισμού και χρησιμοποιείται κυρίως σε μικροβιολογικά δείγματα. Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί την εξειδίκευση των αντισωμάτων στο αντιγόνο τους για να στοχεύσουν φθορίζουσες χρωστικές σε συγκεκριμένους στόχους βιομόρια εντός ενός κυττάρου και συνεπώς επιτρέπει οπτικοποίηση της κατανομής του μορίου στόχου διαμέσου του δείγματος. Η ειδική περιοχή που αναγνωρίζει ένα αντίσωμα σε ένα αντιγόνο ονομάζεται επίτοπος. Έχουν καταβληθεί προσπάθειες σε χαρτογράφηση επιτόπιων επειδή πολλά αντισώματα μπορούν να δεσμεύσουν τον ίδιο επίτοπο και τα επίπεδα δέσμευσης μεταξύ αντισωμάτων που αναγνωρίζουν τον ίδιο επίτοπο μπορεί να ποικίλουν. Επιπροσθέτως, η δέσμευση του φθοροφόρου στο ίδιο το αντίσωμα δεν μπορεί να επηρεάσει την ανοσολογική εξειδίκευση του αντισώματος ή την ικανότητα δέσμευσης του αντιγόνου αυτού. Ο ανοσοφθορισμός είναι ένα ευρέως χρησιμοποιούμενο παράδειγμα ανοσοχρωματοποίησης (χρησιμοποιώντας αντισώματα για τη χρώση πρωτεϊνών) και είναι ένα ειδικό παράδειγμα ανοσοϊστοχημείας (η χρήση της σχέσης αντισώματος-αντιγόνου στους ιστούς). Αυτή η τεχνική χρησιμοποιεί κυρίως φθοροφόρα για να απεικονίσει τη θέση των αντισωμάτων.
Ο ανοσοφθορισμός μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε τομές ιστών, καλλιεργημένες κυτταρικές σειρές ή μεμονωμένα κύτταρα και μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανάλυση της κατανομής πρωτεϊνών, γλυκανών και μικρών βιολογικών και μη βιολογικών μορίων. Αυτή η τεχνική μπορεί ακόμη και να χρησιμοποιηθεί για την απεικόνιση δομών όπως ινών ενδιάμεσου μεγέθους. Εάν η τοπολογία μιας κυτταρικής μεμβράνης δεν έχει ακόμη προσδιοριστεί, η εισαγωγή επιτόπιου σε πρωτεΐνες μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε συνδυασμό με τον ανοσοφθορισμό για τον προσδιορισμό των δομών. Ο ανοσοφθορισμός μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί ως μια «ημιποσοτική» μέθοδος για να αποκτήσει γνώσεις στα επίπεδα και τα πρότυπα εντοπισμού της μεθυλίωσης του DNA, καθώς είναι μια πιο χρονοβόρα μέθοδος από ό, τι οι πραγματικές ποσοτικές μέθοδοι και υπάρχει κάποια υποκειμενικότητα στην ανάλυση των επιπέδων μεθυλίωσης . Ο ανοσοφθορισμός μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε συνδυασμό με άλλες μεθόδους μη αντισώματος φθορίζουσας χρώσης, για παράδειγμα, χρήση DAPI για σήμανση DNA. Διάφορα σχέδια μικροσκοπίων μπορούν να χρησιμοποιηθούν για ανάλυση δειγμάτων ανοσοφθορισμού. το απλούστερο είναι το μικροσκόπιο επιφθορισμού και το ομοεστιακό μικροσκόπιο χρησιμοποιείται επίσης ευρέως. Μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν διάφορα σχέδια μικροσκοπίου υψηλής ανάλυσης που είναι ικανά για πολύ μεγαλύτερη ανάλυση.
[Μικροσκοπία][Αντιγόνο][Πρωτεΐνη]
1.Τύποι
1.1.Παρασκευή φθορισμού
1.2.Πρωτογενής (άμεση)
1.3.Δευτερεύον (έμμεσο)
2.Περιορισμοί
3.Προκαταβολές
[Μεταφόρτωση Περισσότερο Περιεχόμενα ]


Πνευματική ιδιοκτησία @2018 Lxjkh