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Burkholderia pseudomallei
1.Identificación [Modificación ]
B. pseudomallei no es fastidioso y crece en una gran variedad de medios de cultivo (agar sangre, agar MacConkey, EMB, etc.). El medio de Ashdown (o medio de Burkholderia cepacia) puede usarse para el aislamiento selectivo. Las culturas generalmente se vuelven positivas en 24 a 48 horas (esta tasa de crecimiento rápido diferencia al organismo de B. mallei, que generalmente tarda un mínimo de 72 horas en crecer). Las colonias están arrugadas, tienen un aspecto metálico y poseen un olor a tierra. En la tinción de Gram, el organismo es una varilla Gram-negativa con un aspecto característico de "imperdible" (tinción bipolar). En las pruebas de sensibilidad, el organismo parece altamente resistente (es innatamente resistente a una gran cantidad de antibióticos, incluyendo colistina y gentamicina) y eso lo diferencia de B. mallei, que por el contrario es exquisitamente sensible a una gran cantidad de antibióticos. Solo para muestras ambientales, es necesaria la diferenciación de la B. thailandensis no patógena utilizando una prueba de arabinosa (B. thailandensis nunca se aísla de las muestras clínicas). La identificación de laboratorio de B. pseudomallei ha sido descrita en la literatura.
La descripción clásica del libro de texto de B. pseudomallei en muestras clínicas es de una barra Gram-negativa intracelular, con tinción bipolar, pero esto tiene poco valor para identificar el organismo a partir de muestras clínicas. Algunos sugieren que la tinción de Wayson es útil para este propósito, pero se ha demostrado que este no es el caso.
La identificación de laboratorio de B. pseudomallei puede ser difícil, especialmente en los países occidentales donde raramente se ve. Las colonias grandes y arrugadas se ven como contaminantes ambientales, por lo que a menudo se descartan por no tener importancia clínica. La morfología de la colonia es muy variable y una sola cepa puede mostrar múltiples tipos de colonia, por lo que el personal de laboratorio inexperto puede creer erróneamente que el crecimiento no es puro. El organismo crece más lentamente que otras bacterias que pueden estar presentes en muestras clínicas, y en especímenes de sitios no estériles, es fácil de cultivar. Las muestras no estériles deberían, por lo tanto, cultivarse en medios selectivos (por ejemplo, medio de Ashdown o B. cepacia). Para muestras muy contaminadas, como las heces, se ha propuesto una versión modificada de Ashdown que incluye norfloxacina, amoxicilina y polimixina B. En hemocultivo, se ha demostrado que el sistema BacT / ALERT MB (normalmente utilizado para el cultivo de micobacterias) por bioMérieux tiene rendimientos superiores en comparación con los medios de cultivo de sangre convencionales.
Incluso cuando se reconoce que el aislamiento es significativo, los sistemas de identificación comúnmente utilizados pueden identificar erróneamente al organismo como Chromobacterium violaceum u otros bacilos gramnegativos no fermentadores como Burkholderia cepacia o Pseudomonas aeruginosa. De nuevo, debido a que rara vez se ve la enfermedad en los países occidentales, la identificación de B. pseudomallei en cultivos puede no desencadenar en realidad alarmas en médicos que no están familiarizados con la enfermedad. Los métodos bioquímicos de rutina para la identificación de bacterias varían ampliamente en su identificación de este organismo: el sistema API 20NE identifica con precisión B. pseudomallei en el 99% de los casos, al igual que el sistema automatizado Vitek 1, pero el sistema automatizado Vitek 2 solo identifica el 19% de aislamientos
El patrón de resistencia a los antimicrobianos es distintivo y ayuda a diferenciar el organismo de P. aeruginosa. La mayoría de los aislamientos de B. pseudomallei son intrínsecamente resistentes a todos los aminoglucósidos (a través de un mecanismo de bombeo de salida), pero sensibles a la amoxicilina: este patrón de resistencia casi nunca ocurre en P. aeruginosa y es útil para la identificación. Desafortunadamente, la mayoría de las cepas en Sarawak, Borneo, son susceptibles a aminoglucósidos y macrólidos, lo que significa que las recomendaciones convencionales para el aislamiento y la identificación no se aplican allí.
Los métodos moleculares (PCR) de diagnóstico son posibles, pero no rutinariamente disponibles para el diagnóstico clínico. También se ha descrito la hibridación fluorescente in situ, pero no se ha validado clínicamente y no está disponible comercialmente. En Tailandia, un ensayo de aglutinación de látex es ampliamente utilizado, mientras que una técnica de inmunofluorescencia rápida también está disponible en un pequeño número de centros.
2.Desinfección
3.Importancia médica
4.Tratamiento con antibióticos y pruebas de sensibilidad
5.Mecanismos de patogenicidad y factores de virulencia
6.Candidatos a la vacuna
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