اراکین : اور کموینیکیشن |شمولیت اختیار کریں |نئے سوالات کا اندراج
کے لئے تلاش کریں
[میں ترمیم کریں ] آلودگی کلوننگ
آلوکولر کلوننگ آکسیول حیاتیات میں تجرباتی طریقوں کا ایک سیٹ ہے جو دوبارہ ملبوسات ڈی این اے انوکٹوں کو جمع کرنے اور میزبان حیاتیات کے اندر ان کی نقل کو براہ راست کرنے کے لئے استعمال کیا جاتا ہے. کلوننگ لفظ کا استعمال اس حقیقت سے مراد ہے کہ یہ طریقہ ایک ہی جی ڈی این انووں کے ساتھ خلیوں کی آبادی پیدا کرنے کے لئے ایک انو کی نقل میں شامل ہے. آلوکولر کلوننگ عام طور پر دو مختلف حیاتیات سے ڈی این اے کے طریقوں کا استعمال کرتے ہیں: جن پرجاتیوں کو ڈی این اے کا ذریعہ کلون کیا جانا ہے، اور ان پرجاتیوں جو دوبارہ تابکاری ڈی این اے کی نقل کے لئے زندہ میزبان کے طور پر کام کرے گی. جدید حیاتیات اور ادویات کے کئی عصر حاضر علاقوں میں آلودگی کلوننگ طریقوں کا مرکز ہے.
ایک روایتی آناختی کلوننگ تجربے میں، ڈی این اے کلون بننے کے لئے دلچسپی کی ایک حیاتیات سے حاصل کی جاتی ہے، پھر چھوٹے ڈی این اے ٹکڑوں کو پیدا کرنے کے لئے ٹیسٹ ٹیوب میں اینجیمز کے ساتھ علاج کیا جاتا ہے. اس کے بعد، یہ ٹکڑے ٹکڑے ٹکڑے کر کے بعد میں دوبارہ وابستہ ڈی این اے انوولک پیدا کرنے کے لئے ویکٹر ڈی این اے کے ساتھ مل کر کیا جاتا ہے. پھر دوبارہ تابکاری ڈی این اے ایک میزبان حیاتیات (عام طور پر آسان، بڑھانے، ای E. کولی بیکٹیریا کے لیبارٹری کشیدگی) میں متعارف کرایا جاتا ہے. یہ حیاتیات کی آبادی پیدا کرے گی جس میں دوبارہ تابکاری ڈی این اے انوولس میزبان ڈی این اے کے ساتھ نقل کیا جاتا ہے. کیونکہ ان میں غیر ملکی ڈی این اے ٹکڑے ہوتے ہیں، یہ ٹرانجنک یا جینیاتی طور پر نظر ثانی شدہ مائکروجنسیزم (GMO) ہیں. یہ عمل اس حقیقت سے فائدہ اٹھایا جاتا ہے کہ ایک بایکٹیریل سیل کو دوبارہ ایک تابکاری سے متعلق ڈی این اے انوول کو اپنانے اور اس کا پیچھا کرنے کے لئے حوصلہ افزائی کی جا سکتی ہے. اس واحد سیل کو توسیع سے زیادہ وسیع بیکٹیریا پیدا کرنے کے لئے وسیع کیا جاسکتا ہے، جن میں سے ہر ایک اصل ریموٹینٹن انو کی کاپیاں شامل ہیں. اس طرح، نتیجے میں بایکٹیریل آبادی، اور دوبارہ تابکاری ڈی این اے، عام طور پر "کلونز" کہا جاتا ہے. سختی سے بولنا، دوبارہ تابکاری ڈی این اے ڈی این اے انو سے مراد ہے، جبکہ انوکل کلوننگ ان کو جمع کرنے کے لئے استعمال تجرباتی طریقوں سے متعلق ہیں. خیال یہ تھا کہ مختلف ڈی این اے کے سلسلے میں ایک پلاسمیڈ میں ڈال دیا جا سکتا ہے اور یہ غیر ملکی ترتیب بیکٹیریا میں لے جائیں گے اور پلاسمڈ کے حصے کے طور پر کھینچیں گے. یہی ہے، یہ پلاسمیڈ جین لے جانے کے لئے کلوننگ ویکٹر کے طور پر کام کرسکتے ہیں.
عموما کسی بھی ڈی این اے کی ترتیب کلون اور پریس کیا جا سکتا ہے، لیکن کچھ عوامل موجود ہیں جو عمل کی کامیابی کو محدود کرسکتے ہیں. ڈی این اے کی ترتیبات کی مثالیں جو کلون کو مشکل ہیں ان میں سے بار بار بار بار، نقل نقل کے مرکز، سینٹرومیرس اور ٹیلیومیرز ہیں. ایک اور خصوصیت جو کامیابی کی امکانات کو محدود کرتی ہے، ڈی این اے ترتیب کا بڑا سائز ہے. 10kbp سے زیادہ اندراجات بہت محدود کامیابی حاصل کرتی ہیں، لیکن بیکٹیریافس λ جیسے بیکٹیریافوجس کو ترتیب میں کامیابی سے 40 کلو گرام تک تبدیل کرنے کے لئے نظر ثانی کی جا سکتی ہے.
[میزبان: حیاتیات]
ہسٹری.1
جائزہ.2
مرحلے.3
میزبان حیاتیات اور کلوننگ ویکٹر کا انتخاب.1.3
ویکٹر ڈی این اے کی تیاری.2.3
ڈی این اے کی تیاری کلون بن جائے گی.3.3
ڈی این اے کے لیگاس کے ساتھ دوبارہ تابکاری ڈی این اے کی تخلیق.4.3
میزبان حیاتیات میں دوبارہ تابکاری ڈی این اے کا تعارف.5.3
ویکٹر کے انداز پر مشتمل حیاتیات کا انتخاب.6.3
مطلوبہ ڈی این اے اندراج اور حیاتیاتی خصوصیات کے ساتھ کلونوں کے لئے اسکریننگ.7.3
درخواستیں.4
جینوم تنظیم اور جین اظہار.1.4
ریموٹینٹ پروٹین کی پیداوار.2.4
ٹرانجنک حیاتیات.3.4
جین تھراپی.4.4
[اپ لوڈ کریں مزید فہرست ]

Lxjkh 2018@ حقوق نقل و اشاعت